Цитологія носового секрету

Цитологія носового секрету і її клінічна трактування недостатньо широко впроваджені в практику лікувальних установ. Разом з тим, даний метод дослідження досить інформативний, так як клітинний склад носового секрету зазвичай відображає особливості патологічного процесу в порожнині носа і в багатьох випадках доповнює дані ендоскопічного дослідження, дає можливість уточнити морфологічний діагноз, від якого залежить вибір і результати лікування.

Цитограми носового секрету є достовірним діагностичним критерієм алергічного стану слизової оболонки порожнини носа. За даними досліджень, поєднання еозинофілії і наявності базофільних клітин (більше 10 в полі зору) в мазках з порожнини носа зазначається у 94% хворих з постійною формою алергічного риніту та у 74% хворих із сезонним алергічним ринітом. Діагностичну цінність при визначенні алергії поряд з радиоаллергосорбентным і провокаційним тестами є визначення ступеня дегрануляції базофільних гранулоцитів.

Найбільш простим способом цитології носового секрету є метод мазків-відбитків, а також метод отримання носового секрету, що полягає в стимуляції секреції целюлозної губкою, введеної в порожнину носа з наступною аспірацією секрету. Однак носовий секрет представляє негомогенную в'язку рідину з нерівномірним розподілом в ній клітинних елементів, тому проведення точних кількісних цитологічних досліджень в цих умовах практично здійснити неможливо. Гомогенізація носового секрету є обов'язковим, головним методологічним прийомом забезпечення всіх подальших умов стандартизації методики.

Методика цитології носового секрету: центріфужную мірну пробірку відбирають 0,5 мл носового секрету, який розводять у співвідношенні 1:1 2,5% розчином димексиду, легко проникає в тканини і забезпечує хорошу збереження клітинних структур досліджуваного матеріалу.

Суміш струшують протягом 2-3 хвилин, центрифугують 15 хвилин при швидкості 3000 об/хв. Потім з 0,1 мл клітинного осаду на двох предметних стеклах готуються мазки. На одне скло наносять 0,05 мл і клітинний осад розподіляють рівномірно по всій поверхні скла шляхом зміщення їх один відносно одного (товщина клітинного шару на одному склі становить 50 мкм). Отриманий мазок висушують, фіксують метанолом, забарвлюють за методом Романовського-Гимзы і поміщають під мікроскоп.

Техніка підрахунку. Підрахунок клітин здійснюється за допомогою квадратно-сітчастого окуляра при збільшенні в 200 разів (окуляр - 10, об'єктив - 20) або 280 (окуляр - 7, об'єктив - 40). Площа поля зору при такому збільшенні становить 40000 кв. мкм, кількість клітин в одному полі зору від 1 до 10 (n).

Для забезпечення точності кількісної оцінки клітинного складу в препараті (%) необхідно провести підрахунок не менше 200 клітин. З цією метою підбирають кількість полів зору (m) по таблиці з розрахунку: m = 200/n.

Поля зору, необхідні для підрахунку заданого числа клітин, вибирають по двох діагоналях предметного скла, що забезпечує нівелювання помилок, обумовлених нерівномірним розподілом клітинних елементів на поверхні скла. Кількість полів зору залежить від числа клітин в першому випадковому полі зору. Для визначення кількості клітин в 1 мм куб. носового секрету (N) загальна кількість клітин (nk) множать на коефіцієнт (К): N = K*nk.

Коефіцієнт розраховують наступним чином: площа 1 поля зору при збільшенні 200 становить 40000 кв. мкм, товщина мазка - 50 мкм, об'єм середовища в одному полі зору (V) - 2 млн. мкм куб. залежно від кількості полів зору (m) розраховують обсяг дослідженої середовища, тобто той обсяг, у якому налічують nk клітин (V = m*Vk), кількість клітин в 1 мм куб. (N) розраховують за формулою: N = K*nk, де K = 1/V.

З цього ж числа N потім підраховують клітинний склад клітин мазка (%).

Запропонований спосіб цитології носового секрету дає можливість отримати адекватну оцінку його кількісного і якісного складу.

Загрузка...