Для з'ясування послідовності нуклеотидів у цільової частини ДНК, проводять 4 полімеразні реакції. У кожну з чотирьох сумішей реакції обов'язково потрібно додати дезоксинуклеозид - трифосфати (дЦТФ, дГТФ, дТТФ, дАТФ) і ДНК-полімеразу. Крім цього, в кожну з пробірок додають один з дидезоксинуклеозидтрифосфатов (ддЦТФ, ддГТФ, ддТТФ і ддАТФ). ддНТФ в 3'-положенні, замість гідроксильної групи (ВІН) містить водень (Н). ddНТФ бере участь у реакції полімеризації ДНК і відразу припиняє її. У кожній реакційної суміші співвідношення між дЦТФ, дГТФ, дТТФ, дАТФ і одним з ддНТФ становить 100:1. З-за низької концентрації ддНТФ реакція не закінчується на початку секвенування ДНК. У той же час реакційна суміш буде містити велику кількість фрагментів ДНК різної довжини (через приєднання ддНТФ в різних точках зростаючої нитки ДНК).
З допомогою електрофорезу продукти полімеризації ДНК поділяють і отримують послідовність цільової ДНК.
Чистотіл. Застосування, корисні властивості, лікування
