Медичні терміни: А Б В Г Д Е Є Ж З І Ї Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Ю Я

Статистика




На порталі: 4
З них гостей: 4
І користувачів: 0
ДНК-секвенування

ДНК-секвенування

Метод визначення порядку нуклеотидних основ у ДНК-мішені.  Цей метод був винайдений британським вченим Фридериком Сенгером в 1975.  В якості матриці при ДНК-секвенировании використовується одноланцюжкова ДНК.  Для ініціації секвенування ДНК ДНК-полімеразою використовуються синтетичні праймери або природні субфрагменты, отримані за допомогою рестриктаз.  3'-кінець праймера повинен закінчуватися перед ділянкою ДНК, який буде секвенироваться. 

Для з'ясування послідовності нуклеотидів у цільової частини ДНК, проводять 4 полімеразні реакції.  У кожну з чотирьох сумішей реакції обов'язково потрібно додати дезоксинуклеозид - трифосфати (дЦТФ, дГТФ, дТТФ, дАТФ) і ДНК-полімеразу.  Крім цього, в кожну з пробірок додають один з дидезоксинуклеозидтрифосфатов (ддЦТФ, ддГТФ, ддТТФ і ддАТФ).  ддНТФ в 3'-положенні, замість гідроксильної групи (ВІН) містить водень (Н).  ddНТФ бере участь у реакції полімеризації ДНК і відразу припиняє її.  У кожній реакційної суміші співвідношення між дЦТФ, дГТФ, дТТФ, дАТФ і одним з ддНТФ становить 100:1.  З-за низької концентрації ддНТФ реакція не закінчується на початку секвенування ДНК.  У той же час реакційна суміш буде містити велику кількість фрагментів ДНК різної довжини (через приєднання ддНТФ в різних точках зростаючої нитки ДНК). 

З допомогою електрофорезу продукти полімеризації ДНК поділяють і отримують послідовність цільової ДНК. 
Категорія: Біологія | Переглядів: 2406 | Рейтинг: 0.0/0
Поділіться статтею з іншими:

Акушерство Алергологія Анатомія людини Андрологія
Анестезіологія Біоетика, біобезпека Біологія Валеологія
Венерологія Відпочинок Вірусологія Гастроентерологія
Гематологія Гігієна Гомеопатія Дерматологія
Дієтологія Ендокринологія Епідеміологія Імунологія
Інфекційні хвороби Кардіологія Косметологія Мамологія
МНС Наркологія Невідкладна допомога Неврологія
Нетрадиційна медицина Нефрологія Онкологія Ортопедія
Отоларингологія Офтальмологія Педіатрія Перша допомога
Проктологія Пульмонологія Психіатрія Психологія
Радіологія Сексологія Стоматологія Терапія
Токсикологія Травматологія Шкідливі звички Урологія
Фармакологія Фізіологія Фізична культура Флебологія
Фтизіатрія Хірургія
Корисні лінки: Медичні книги | Медичні обстеження | Анатомія людини