Морфологічне дослідження носа

Матеріалом для морфологічного дослідження носа служать біоптати слизової оболонки з порожнини носа і навколоносових пазух і матеріал, отриманий під час операції.

Шматочки тканини фіксують у 10% розчині нейтрального формаліну, заливають у парафін, на ротаційному мікроскопі виготовляли серійні зрізи товщиною 5 мкм, їх фарбували гематоксилином та еозином, за методом Вергоффа, забарвлення толуїдиновим синім при рН 2,6 і 5,3, за методом Унна-Паппенгейма, ставили PAS-реакцію. Частина матеріалу поміщають в рідкий азот для визначення активності 11 окисно-відновних ферментів: лактатдегідрогенази (ЛДГ), лактатдегідрогенази з сечовиною (ЛДГ-М), малатдегидрогеназы (МДГ), сукцинатдегідрогенази (СДГ), глютаматдегидрогеназы (ГДГ), НАДФ-залежних МДГ і ГДГ, альфа-глицерофосфатдегидрогеназы (альфа-ГФДГ), глюкозо-6-фосфатдегідрогенази (Г-6-ФДГ), НАД - і НАДФ-диафораз. Оцінка активності окисно-відновних ферментів проводиться шляхом визначення оптичної щільності скануванням по площі.

Вивчення комплексу дегідрогеназ дозволяє оцінювати інтенсивність і спрямованість основних процесів тканинного метаболізму: тканинного дихання (СДГ, МДГ, альфа-ГФДГ), гліколізу (ЛДГ, ЛДГ-М), пентозо-фосфатного шунта (Г-6-ФДГ); НАД-диафоразы - дати загальну оцінку і визначити співвідношення всередині - і внемитохондриальных процесів енергоутворення: за рівнем активності ГДГ, ГЛГ-НАДФ, МДГ-НАДФ оцінена інтенсивність процесів метаболізму білків і вуглеводів. Отримані при гистоэнзимологическом дослідженні дані враховувалися при аналізі результатів планиметрического, гистохимического вивчення епітелію слизової оболонки носа.

Морфометричні визначення питомого об'єму слизових та серозних залоз, питомого об'єму судин, питомого об'єму келихоподібних клітин в епітелії проводиться за методикою Р. Р. Автандилова.

Електронно-мікроскопічне дослідження біоптатів слизової оболонки порожнини носа проводяться за загальноприйнятою схемою з фіксацією матеріалу осмієвої кислотою за методом Паладу і ув'язненням в суміш эпонов з додатковим контрастуванням уранилцитратом свинцю згідно методу Рейнольдса. Для попередньої оцінки матеріалу використовують полутонкие зрізи, забарвлені толуїдиновим синім.

Загрузка...