Медичні терміни: А Б В Г Д Е Є Ж З І Ї Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Ю Я

Статистика




На порталі: 7
З них гостей: 7
І користувачів: 0
Розщеплення ДНК метилированої

Розщеплення ДНК метилированої

Метилювання ДНК - це процес перенесення метилтрансферазой метильної групи від молекули донора до молекулі цитозина або аденіну.  Такого типу метилювання є найбільш поширеним процесом модифікації ДНК в живих організмах.  Переважно три типи метильованих підстав знайдені в ДНК: 1) 5`-метилцитозин (5mC); 2) N4-метилцитозин (m4C); 3) N6-метиладенин (m6A). 

У прокаріотів, розщеплення ДНК спорідненими ферментами попереджено метилированием ДНК сайт-специфічними метилтрансферазами, які є невід'ємною частиною кожної системи рестрикції-модифікації.  Більшість штамів кишкової палички використовуються для розмноження плазмідної ДНК містять дві сайт-специфічні ДНК-метилтрансферази - Dam і Dcm.  Метилаза, що кодується геном dam метилирует N6-положення аденіну з послідовністю GATC.  Метилаза, що кодується геном dcm, метилирует С5-положення внутрішнього залишку цитозина в послідовності CCWGG. 

ДНК вищих эукариотических організмів має залишками 5-метилцитозина в CpG або CpNpG контекстах.  Ці тканеспецифические ознаки наследуемы.  Вони беруть участь у регуляції експресії генів і клітинної диференціації. 

У випадках, коли цільової сайт рестрикції перекривається з метилированным сайтом наступні результати розщеплення можливі: 1) не впливає; 2) часткове гальмування, 3) повна блокада. 

Для досягнення ефективного розщеплення ДНК, необхідно враховувати і тип метилированной ДНК і чутливість рестриктази до метилированной ДНК. 

Однолітерний код (для опису сайтів рестриктаз)

R = G або A; Y = C або T; W = A або Т; М = А або C; K = G або T; S = C або G; H = A, C або T; V = A, C або G; B = C, G або T; D = A, G або Т; N = G, A, T і C; (A, T, G, С - азотисті основи). 

Для забезпечення ефективності розщеплення реакцію проводять під гасом.  Оптимальна температура роботи ферменту - 65 оС.  Якщо метилювання відбувається в CpG, то сайт розщеплення блокується ("CpG" це скорочення для "-Ц-фосфат-Р-", тобто, цитозин і гуанін, розділені фосфатом, який пов'язує два нуклеозиду разом у ДНК).  Не інактивується нагріванням.  2 п. о.  з кінця ДНК необхідні для повного її розщеплення.  Оптимальна температура інкубації становить 65 оС. 

*Цікаві деталі.  Сміт, Вілкокс і Келлі, працюючи в Університеті Джона Хопкінса, в 1968 році виділили і охарактеризували першу рестриктазу, функціонування якої залежала від конкретної нуклеотидної послідовності ДНК.  Працюючи з бактерією Haemophyllus influenzae, ця група вчених ізолювала фермент, званий HindII, який завжди розщеплює молекули ДНК в певному сайті, що складається з шести пар основ в межах певної послідовності шести пар основаниий:

5 'GT (T або C) (A або G) AC 3 "

3 'CA (A або G) (T, або C) TG 5'

Вони виявили, що фермент HindII завжди розщеплює послідовність ДНК безпосередньо в центрі цієї послідовності.  Скрізь, де зустрічається ця послідовність із шести пар підстав, HindII буде розщеплювати обидві ланцюга ДНК між 3 і 4 парами підстав послідовності. 
Категорія: Біологія | Переглядів: 1406 | Рейтинг: 0.0/0
Поділіться статтею з іншими:

Акушерство Алергологія Анатомія людини Андрологія
Анестезіологія Біоетика, біобезпека Біологія Валеологія
Венерологія Відпочинок Вірусологія Гастроентерологія
Гематологія Гігієна Гомеопатія Дерматологія
Дієтологія Ендокринологія Епідеміологія Імунологія
Інфекційні хвороби Кардіологія Косметологія Мамологія
МНС Наркологія Невідкладна допомога Неврологія
Нетрадиційна медицина Нефрологія Онкологія Ортопедія
Отоларингологія Офтальмологія Педіатрія Перша допомога
Проктологія Пульмонологія Психіатрія Психологія
Радіологія Сексологія Стоматологія Терапія
Токсикологія Травматологія Шкідливі звички Урологія
Фармакологія Фізіологія Фізична культура Флебологія
Фтизіатрія Хірургія
Корисні лінки: Медичні книги | Медичні обстеження | Анатомія людини